Biotechnologia.pl
łączymy wszystkie strony biobiznesu
Nowatorska metoda klonowania w poszukiwaniu regionów promotorowych
09.05.2008
Promotory są jednymi z najważniejszych regionów regulatorowych w sekwencjach genomowych. Wykorzystuje się je w wielu procesach biotechnologicznych w celu indukcji ekspresji danego genu w specyficznych warunkach. Nowa metoda poszukiwania takich regionów została opracowana. Genomowe DNA E. coli zostało amplifikowane z użyciem przypadkowych starterów oraz ddNTP. Taki system przewiduje produkcję określonej wielkości fragmentów DNA różniących się w jedną parą zasad. Fragmenty tworzone w tej reakcji miały długość około 100 nukleotydów. Następnie cięto je endonukleazą w celu uzyskania tępo zakończonych cząsteczek podwójnego DNA, które klonowano do wektora zawierającego gen LacZ. Tak przygotowaną biblioteką transformowano komórki E. coli, obserwowano wzrost i tworzenie się niebieskich kolonii na podłożu warunkującym wysokie ciśnienie osmotyczne. Dzięki tej metodzie wykryto nowy promotor indukowalny w warunkach szoku osmotycznego, który może znaleźć zastosowanie w procesach biotechnologicznych.


Wang Z., Jin L., Węgrzyn G., Węgrzyn A., Screening of the osmotic pressure-inducible promoter regions from the whole genome of Escherichia coli by using a novel
KOMENTARZE
news
pn wt śr cz pt sb nd
26 27 28 29 30 31 1
2 3 4 5 6 7 8
9 10 11 12 13 14 15
16 17 18 19 20 21 22
23 24 25 26 27 28 1
Newsletter